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相关文章植物过氧化物酶(POD)(检测服务)过氧化物酶(POD)是一种广泛存在于各种动物、植物和微生物体内的氧化酶,具有消除过氧化氢和酚类胺类毒性的双重作用。POD是植物在逆境条件下酶促防御系统的关键酶之一,与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)协同作用,清除体内过剩的自由基,从而提高植物的抗逆性。本产品仅供科研实验用,不做其他用途。
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植物过氧化物酶(POD)(检测服务)
服务介绍:
植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚微板法)检测原理是以愈创木酚(又称2-甲氧基酚)作为底物,在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法,于酶标仪470nm处测定吸光度,以吸光度变化所需酶量进行计算,主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的过氧化物酶活性,尤其适用于测定水果中过氧化物酶活性。
背景介绍:
过氧化物酶(POD)是一种广泛存在于各种动物、植物和微生物体内的氧化酶,具有消除过氧化氢和酚类胺类毒性的双重作用。
POD是植物在逆境条件下酶促防御系统的关键酶之一,与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)协同作用,清除体内过剩的自由基,从而提高植物的抗逆性。
操作步骤(仅供参考):
1、 准备样品:
①植物样品:取0.5-1.0g植物组织或水果中层果肉加入4ml预冷的POD Lysis Buffer研磨或匀浆,4℃ 10000g离心15~20min,留取上清液,即为POD粗提液
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃冻存,用于过氧化物酶的测定。
③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用POD Lysis Buffer进行适当匀浆,4℃ 10000g离心15~20min,留取上清液,即为POD粗提液,
④高活性样品:如果样品中含有较高活性的过氧化物酶,可以使用POD Lysis Buffer进行恰当的稀释。
2、 配制POD Assay Buffer工作液:取适量的POD氧化剂和POD Assay Buffer,按POD氧化剂:POD Assay Buffer=1:14混合,
3、 POD加样:取96孔板,按照下表设置对照孔孔、测定孔,注意:对照孔、测定孔中为同一待测样品,但对照孔中是提前加热煮沸5min的样品
加入物(μl) | 对照孔 | 测定孔 |
待测样品 | 5(提前煮沸5min) | 5 |
POD Lysis Buffer | 145 | 145 |
POD Assay Buffer工作液 | 100 | 100 |
4、 POD测定:立即以酶标仪,以对照孔为对照,测定470nm处测定孔的吸光度(A测定0);37℃准确孵育3min后,立即加入5μl POD终止液终止反应(备选方案),以对照孔为对照,以酶标仪测定470nm处测定孔的吸光度(A测定1)。
实验结果:
全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。
送样须知:
1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系
2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输
3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知
4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。
备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有绝对保密的责任。
仅供科研实验用,不做其他用途!
植物过氧化物酶(POD)(检测服务)