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总超氧化物歧化酶(SOD)(检测服务)
服务介绍:
有氧化物质存在下核黄素被光还原,在有氧条件下,被还原的核黄素极易再氧化产生超氧阴离子自由基(O2-),O2-可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有强吸收,而SOD可清除超氧阴离子(O2-),从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明SOD活性愈低,反之酶活性愈高,据此通过酶标仪比色分析就可以计算出样品中总超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用SOD抑制NBT在光照下的还原作用来确定酶活性大小,可用于检测植物、组织、细胞、血清或其它样品中SOD活性。
背景介绍:
超氧化物歧化酶(SOD)能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢,是生物体内最重要的自由基清除剂之一。根据其金属辅基的不同,SOD大致可分为三类:Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD。
1、Cu/Zn-SOD:呈蓝绿色,主要存在于真核细胞的细胞质内,被认为存在于比较原始的生物类群中且分布最-广的一种。
2、Mn-SOD:呈粉红色,主要存在于原核生物和真核生物的线粒体中。
3、Fe-SOD:呈黄褐色,主要存在于原核细胞中。
作用与功能:
1、抗氧化与抗衰老:SOD能够清除和减少人体内过多的自由基,避免其对细胞过度的损伤,具有抗氧化和抗衰老的作用。
2、预防心血管疾病:SOD能够清除有害的自由基,改善血脂异常,预防动脉粥样硬化,从而预防心血管疾病的发生。
3、预防肿瘤发生:SOD可以清除自由基,从而预防肿瘤的发生、发展,还可以缓解放化-疗产生的副作用。
4、抗炎作用:SOD具有抗炎作用,能够减轻炎症反应,缓解疼痛,对类风湿性关节炎等炎症性疾病具有一定的治疗作用。
5、增强免疫力:SOD能够提高机体的免疫力,通过清除自由基,降低氧化应激,促进免疫细胞的增殖和活化,提高机体的抵抗力
操作步骤(仅供参考):
(1) 样本接收:血清、血浆、透明液体状样本、组织匀浆、植物等
(2)实验步骤:
1.准备SOD标准品:将SOD标准品稀释至如下系列浓度:200、100、50、20、10、5、2U/ml,各取20μl参考样品进行检测。
2.选取合适的光源:在光照培养箱或日光灯下,用光度仪测定光度值为3500~4000Lx的适合光照反应的位置,做出标记。
3.配制NBT工作液:将Met缓冲液与NBT溶液按23:3的比例混合。
4.SOD加样:用96孔板设置空白对照孔、光照对照孔、测定孔,在低光强条件下加入待测样品和其它各种溶液,加入FD溶液后充分混匀。
5.SOD测定:混匀,取空白对照孔置于暗处,其他各孔置于4000Lx日光下反应20min;反应结束后,以不照光的空白对照孔调零,用酶标仪测定560nm处吸光度。
送样须知:
1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系
2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输
3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知
4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。
备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有绝对保密的责任。
仅供科研实验用,不做其他用途!
总超氧化物歧化酶(SOD)(检测服务)