ELISA测定人尿金属硫蛋白的初步应用---人ELISA试剂盒的使用小例子
更新时间:2013-05-03
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金属硫蛋白广泛存在于机体各脏器组织中,其作用尚未*阐明,但在胚胎的发育分化,微量元素的代谢平衡.抗氧化损伤等方面起着重要的病理和生理作用.它受多种应激因素,尤其是有毒金属和类金属 如镉/汞/砷等诱导,使他在研究环境一机体交互作用中备受关注.MT的检测时对其进行深入研究的基础,目前多见于动物实验,而人尿MT的测定,仅有少量报道,本文将竞争ELISA法初步用于尿样MT的检测,现报告如下:
1/ 材料和方法
1/1 试剂和仪器
抗MT兔血清(一抗,由上海信帆生物科技有限公司提供);二抗生物素化羊抗兔IGG(由上海信帆生物有限公司提供)为VECTO集团产品;亲和素化辣根过氧化酶(购自DAKO公司)底物OPD为SIGMA公司产品;所有试剂均为分析纯,磷酸缓冲溶液按D。CATTY配方配制。聚苯乙烯酶标购自上海信帆生物科技有限公司;酶标仪紫外分光光度仪为日本岛津公司产品。WESTERN BLOTTING器材购自bio-rad公司。
1/2 人的MT分离纯化
1/3 MT竞争elisa的步骤