鸡红细胞悬液的制备通常用于血清学实验、血凝实验和免疫学研究等领域,通过无菌采集抗凝鸡血,经过离心技术移去大部分血浆后,再加入红细胞保存液制备而成的。以下是一个基本的
鸡红细胞悬液制备流程的关键步骤:
1、采集血液:选择健康的鸡只,通过静脉采血的方式收集血液。常用的采血部位是翅静脉或颈静脉。采血时需要使用无菌的针头和试管,并确保鸡只不受不必要的压力和伤害。
2、抗凝处理:为了防止血液凝固,需要在采血管中预先加入抗凝剂。常用的抗凝剂包括EDTA、肝素或Alsever溶液。抗凝剂的使用量应根据采血量来确定。
3、离心分离:将采集的血液在离心机中进行离心,以分离红细胞和其他血液成分。离心的条件(如转速和时间)需要根据实验要求和设备性能来调整。
4、洗涤红细胞:离心后,移除上清液,然后用生理盐水或PBS(磷酸盐缓冲溶液)重悬红细胞沉淀。重复洗涤几次,直到上清液清澈,以去除血浆成分和抗凝剂。
5、制备悬液:将洗涤后的红细胞沉淀按照所需的浓度重悬于适量的生理盐水、PBS或其他适当的缓冲液中。通常情况下,会制备成一定比例的鸡红细胞悬液。
6、红细胞计数:如果需要精确控制红细胞的数量,可以使用血球计数板对红细胞进行计数,并据此调整浓度。
7、贮存:如果不立即使用,应将其存放在2-8°C的冰箱中,并注意避免冻结。有效期有限,通常是几天到一周,具体取决于保存条件和处理方式。
请注意,实验操作应严格遵守实验室的安全规范,操作人员应穿戴适当的防护装备,并在有适当培训和指导的情况下进行。