组织样本中的甘油含量如何检测更精确

 组织样本中的甘油含量如何检测更精确

上海信帆生物供应组织样本甘油检测试剂盒，下面我们来看看如何测定组织样本，才能更加精确！

首先我们来看一下：样本应该如何处理？

组织细胞裂解

细胞(包括分化的脂肪细胞)裂解： 消化、离心收集细胞。或直接在培养皿内裂解。通常6孔板单孔约2x106个细胞，75cm2瓶约1x107细胞。按比例每 1~2 x 106细胞加 0.1ml 裂解液，混匀，静置 10 分钟。

动物组织裂解：

切记要预先将新鲜组织剪切称重后再进行保存。组织冻存后再进行解冻、剪切、称重可能会产生严重的测量误差。离心管精确称重，加入组织块后再称重，二者相减(即减量称重法)计算组织量(约 100mg)。强烈建议按比例每 1mg 组织加10µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。（注意；裂解液用量在 1ml 或更多可保证有效的裂解与脂质提取）。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织。（不推荐超声方法，因其不能*和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织细胞加入量），而后，静置 10 分钟。

二. 裂解液处理：

1. 取适量上清液转移到 1.5ml 离心管中，进行步骤

2 的操作。余下的裂解液可用 BCA 法蛋白定量试剂盒进行蛋白定量或－20ºC 储存。

2. 70ºC 加热 10 分钟灭活脂肪酶，可能出现絮状沉淀。

3. 室温 5000rpm 离心 5 分钟，上层清液即可用于酶学测定。

注意：当甘油浓度较低时，可将待测样品与工作溶液按照100µl:100µl体积混合，然后再进行测定，但是如果样品体积超过100µl时将会稀释工作液中酶的浓度，使反应灵敏度下降。如果待测样品浓度超过线性范围，可进行适当稀释，然后根据稀释倍数来计算样品中甘油浓度。）

 组织样本中的甘油含量如何检测更精确