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这样操作Elisa试剂盒太方便了

更新时间:2021-05-26      浏览次数:984
   ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,然而实验新手们面对各种各样、动则上上千种的ELISA试剂盒,内心应该是崩溃的。下面跟小编一起看看怎么操作它。
  Elisa试剂盒的操作步骤
  一、样品准备
  1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
  2.用样品稀释液将待检血清按稀释(如血清加入样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
  3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
  二、检验方法
  1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
  2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
  3.空白对照孔加样品稀释液;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照;样品孔每孔加入稀释后的样品。
  4.混匀,置37℃反应30分钟。
  5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
  6.每孔加酶标记物(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
  7.洗涤,同步骤5。
  8.每孔依次加底物液A、底物液B各,混匀,37℃避光反应10分钟。
  9.每孔加终止液,混匀,用空白孔调零,于(可用作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
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