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上海信帆生物供应血管紧张素1放免试剂盒,提供放免检测服务

更新时间:2019-12-17      浏览次数:1023

上海信帆生物供应血管紧张素1放免试剂盒,提供放免检测服务!该试剂盒样本收集的时候,请一定加入酶抑制剂,如果要检测的话,样本收集好了,请尽快检测!本公司是提供放免实验代测服务的,如果您有不清楚的地方,可以随时咨询我们!

 

血管紧张素放免分析试剂盒

125I- Angiotensin Radioimmunoassay Kit

ARIA Kit

原理(Principles

血浆肾素活性(PRA)的测定是以血管紧张素(A)产生的速率来表示的。血浆中加入

酶抑制剂来抑制转化酶和血管紧张素酶的活性,A不再进一步降解,使测定结果准确。PRA

的测定是取双份血浆,一份血浆在 37℃温育一小时,使肾素作用于血管紧张素原产生 A作为

测定管,另一份血浆在 4℃放置作为对照管。应用放射免疫分析法 A的浓度减去对照管 A

的浓度,被温育时间除之,则为单位时间内 A产生的速率,称为肾素活性。本分析药盒标记

物为 125I-A,采用免疫分离剂分离,快速﹑方便﹑准确。

用途(Intended Use

肾素是由肾脏近球体细胞产生的分子量为 40000 的一种羧基蛋白水解酶。它作用于血管紧

张素原产生血管素(A10 )A在转化酶的作用下形成血管紧张素(A8 肽)。肾素-血

管紧张素系统有多种生理功能。在调节人体血压、水和电解质平衡代谢过程中起着重要作用。

另外,它与一些肾脏疾病及与肾脏有关的一些疾病有密切关系。

血浆肾素活性(PRA)和 A浓度的测定已成为原发性和继发性高血压分型诊断、治疗及

研究的重要指标。对一些有关肾脏疾病的诊断、治疗以及发病机理的探讨有着重要的意义。

药盒组成(Components of Kit

1)

A标准品:冻干品,一套共 7 瓶,用 1 mL 温育液溶解

A

B

C

D

E

F

单位

0

0.2

0.6

1.8

5.4

12

ng/mL

2)

125I-A1 瓶 冻干品,100T 11 mL 温育液溶解,50T 5.5 mL 温育液溶解。

标准品、标记物溶解后分装–10℃保存可用一个月,避免反复冻融。

3)

A抗体:

1 瓶 冻干品,100T 12 mL 温育液溶解,50T 6 mL 温育液溶解,

4) 温育液:

1

5) 分离剂:

1 瓶 使用前必须充分摇匀

6) 抗凝剂:

1 瓶 若有晶体析出可加热溶解

7) 酶抑制剂: 2

正常参考值(Normal Serum values

各实验室应根据本实验室条件及接触人群的不同,建立自己的正常值范围。

下列数据仅供参考:

坐姿: 1.68 ± 1.12 ng/mL注意事项(Attention):血样的采集和保存

1) 待样本脉搏稳定后,坐姿采集肘静脉血 2 mL,迅速注入在冰水浴中冷却的含 20 μL EDTA

试管中,摇匀,放冰水浴中冷却后,在 1000 /分离心 5 分钟( 4℃离心),分离血浆,

取血浆 1 mL 放入另一支已预冷的含有 10 μL 酶抑制剂 1 20 μL 酶抑制剂 2 的试管中摇匀,

立即测定或置–20℃冰箱保存,可用两周。

2) 激发试验,样本在基础状态采血后,给肌肉注射速尿(0.7 mg/Kg 体重)。总剂量不超过 50

mg,保持立位不饮水,两小时后坐姿采血。

注意:注射速尿后两小时内随尿排出的水电解质较多,如样本血钾过低,试血前应适当给

予补充,试验过程中样本可能出现口渴、无力、出汗等,一般不重,如过重应酌情终止试

验,让样本平卧,并给予糖盐茶水。

3) β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平,一般在停药两周

后测 PRA,得血平等代谢慢的药物应停药三周后测定,不适停药的样本应改服胍乙啶等影

PRA 较小的降压药。

4) 钠摄入量影响机体 PRA 水平,样本测定 PRA 三天前应适当减少钠盐摄入量,样本应测定

取血前 24 小时尿钠的含量,以供分析 PRA 结果时参考。

操作流程(Assay Procedure

冰冻的血浆样品在流动的冷水中快速融化,快速取两份样品,一份作对照管的放冰水浴中,一

份做测定管的在 37℃水浴中保温 1 小时,取出后放入冰水浴中。随后在冰水浴中按下表加样

单位:μL

T

NSB

标准品

样品

A

B

C

D

E

F

G

1

2

···

温育液

200

标准品

100

100

100

100

100

100

100

对照管

100

100

···

测定管

100

100

···

125I-A

100

A抗体

100

摇匀,4℃放 15 小时以上

分离剂

500

充分混匀,室温放置 15 分钟后,3500 rpm 离心 20 分钟

吸去上清液

沉淀计数 1 分钟

数据处理(Calculation

按常规方法计算 NSB%B0%B/B0%

在半对数坐标纸上,以标准品 A浓度为横坐标,以 B/B0%为纵坐标,绘制标准曲线,根

据血浆样品(B/B0%)从标准曲线上查得样品测定管和对照管相应的 A浓度值。

PRA ng/mL/hr = 测定管 A浓度 对照管 A浓度

(当血浆 A浓度超过标准曲线范围时,应将 37℃处理的血浆用温育液适当稀释后复测)

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