PRODUCT CLASSIFICATION
产品分类上海信帆生物供应低密度脂蛋白胆固醇测试盒,提供LDL-C实验代测服务
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测试盒说明书
(直接法)
一、试剂组成及配制(100 管/96 样):
试剂组成 | 规 格 | 组 份 | 浓 度 | 保存条件 |
R1 |
75ml×1 瓶 | Good’s 缓冲液 | 50mmol/L |
2~8℃ 避光保存 |
4-氨基安替比林 | 0.2mmol/L | |||
氯化镁.6 合水 | 15mmol/L | |||
胆固醇氧化酶 | ≥3KU | |||
胆固醇酯酶 | ≥2KU | |||
过氧化物酶 | ≥5KU | |||
表面活性剂 1 | 0.1% | |||
R2 |
25ml×1 瓶 | Good’s 缓冲液 | 50mmol/L | |
Toos | 1.0mmol/L | |||
防腐剂 | 100mg/L | |||
表面活性剂 2 | 0.1% | |||
校准品 | 0.1ml×1 支 | 胆固醇 | 4.3mmol/L |
三、测定步骤:
1、样本处理:
①、血清(浆):直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。
②、培养液样本:吸取培养液,1000 转/分,离心 10 分钟,取上清测定。
[注]:一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。
③、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的匀浆介 质,冰水浴条件下机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。
[注]:1、如组织样本为非高脂样本,匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。 2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。
④、细胞样本:
A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉 淀;用等渗缓冲液(推荐 0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸盐缓冲液)清洗 1~2 次,同样 1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;
B、细胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的匀浆介质(推荐 0.1mol/L、pH7~7.4 磷酸盐缓冲液或生理 盐水)进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率:300W,3~5 秒/次,间隔 30 秒,重复 3~ 5 次)或手动匀浆,制备好的匀浆液不离心待测。也可采用裂解液裂解(推荐 TritonX-100,
1~2%,裂解 30~40 分钟),裂解好的液体不离心直接测定
[注]:一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎*
1、试剂空白管吸光度≤0.050(光径 0.5cm)。
2、灵敏度:测试 2.6mmol/L 被测物时,吸光度差值△A 为 0.180~0.280
3、线性范围:2~12mmol/L,r2>0.995
4、精密度:变异系数≤8%,批间差:相对偏差≤10%
5、稳定性:原包装试剂盒在 2℃~8℃避光保存,有效期为 12 个月。开启后 2℃~8℃避光保存, 可稳定一个月。
四、注意事项:
1、本产品仅用于科研,不得用于研究诊断,切勿服用。
2、样品含量如超出检测范围上*,可用生理盐水稀释样本后进行测定,测定结果乘以稀释倍数。
3、试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
4、试剂与样本量可按照比色杯体积,按比例增减。
2、样品含量如超出检测范围上*,可用生理盐水稀释样本后进行测定,测定结果乘以稀释倍数。
3、试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
4、试剂与样本量可按照比色杯体积,按比例增减。
低密度脂蛋白胆固醇测试盒现货供应,提供LDL-C实验代测服务