软骨染色液（阿利新蓝法,pH1.0）的操作方法

   阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，zui初用于纺织纤维染色。这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成，该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。pH值为2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的酸性黏液物质(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色。
  软骨染色液(阿利新蓝法,pH1.0)利用染液的不同pH 值可区分粘液物质的类属，pH为1时，羧基(COOH)不着色，硫酸基(OSO3H)着色，pH为 2.5 时，羧基染色良好而硫酸粘液着色不佳，使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白着色。
操作步骤(仅供参考)：
1、常规脱钙，二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。
2、入Alcian酸化液浸泡3min。
3、入Alcian染色液染色30min。
4、流水冲洗5min。
5、梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片
注意事项：
1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、该法可区分鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，其pH=1.0。
3、已开封试剂应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套
 本试剂仅适用于科研领域，不适用于研究诊断或其他用途。