λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒如何正确使用

λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒如何正确使用

上海信帆生物公司的λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒，操作简单，价格实惠，资料稳定。是简便的λ噬菌体基因组DNA的试剂盒，其提取原理是通过PEG沉淀、酚异戊醇等提取，残留碎片通过沉淀离心去除，通过一系列快速的漂洗、离心步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除。

获得λ噬菌体基因组DNA，可进行酶切、PCR等下游实验，获得DNA的量很高，但是纯度一般，但是足够用于大多数分子生物学实验。

噬菌体载体广泛用于文库筛选，目的克隆培养获得大量的噬菌体颗粒需要提取λ噬菌体DNA来开展测序等后续工作。λ噬菌体裂解培养物离心后的上清，首先用RNaseA/DNaseⅠ混合酶消化去除残留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌体。

λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒如何正确使用

1、用于裂解的噬菌体、宿主菌越新鲜，裂解越好、收获量越大。

2、液体培养裂解时，到了时间裂解还没发生，可适当的提高温度或加大振摇速度。

3、RNase/DNase消化过度，可能减少产量；消化不*，可粘走部分噬菌体。

4、噬菌体裂解液在低温下易结晶析出白色物质，可37℃温浴至*溶解。

λ噬菌体是长尾噬菌体科的一种温和噬菌体。λ噬菌体是双链DNA噬菌体，有直径55nm的二十面体头部，末端有细长尾丝的非收缩尾。DNA是线性分子，有黏性末端即单链延伸12个核苷酸，故感染后线性基因组可立即环化。

λ DNA有一个噬菌体结合位点，可与细菌结合位点形成碱基配对，细菌结合位点位于大肠杆菌染色体上半乳糖或gal操纵子和生物素操纵子之间。两个位点配对后，整合酶在一种特异宿主蛋白的辅助下催化病毒和细菌DNA链和物理交换，环状λ DNA以线性整合进大肠杆菌DNA上毗邻gal操纵子的位置，称之为前噬菌体。

λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒如何正确使用