放射免疫试剂盒实验操作步骤
1.从集市买一只活鸡现杀取血5ml(防止污染),放入盛有20ml Alsever’s液瓶中,混匀后置冰箱保存备用(2周内使用)。
2.使用前,取用Alsever’s液保存的新鲜鸡血5ml,加入8ml的0.128 mol/L的NaCl溶液,小心混匀,1000 r/min离心5min,如此3次洗涤,zui后配成30%的鸡红细胞(CRBC)悬液。
3.取11支试管,按附表中所示测试溶液,分别取样各3ml,作出标记后,各管均加入红细胞悬液2滴,混匀后静置于温室中,观察各支试管中发生溶血的时间及其变化。
放射免疫试剂盒试验后观察结果
1.试管内液体分两层:上层浅黄色透明,下层红色不透明为不溶血(-),镜检红细胞完好呈双凹盘状。
2.如果试管内液体混浊,上层带红色者,称不*溶血(+或++),镜检有部分红细胞呈碎片。
3.如果试管内液体变红而透明者,称*溶血(+++),镜检发现细胞全部呈碎片。
实验建议
1.鸡血在离心时,试管均需在扭力天平上平衡。
2.目测红细胞体积或置于带刻度的离心管中,加入生理盐水配成30%的红细胞悬液;
3.试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。