BAFF Western blot实验检测

BAFF Western blot实验检测

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B细胞活化因子属肿瘤坏死因子超家族成员(TNFSF13B)，主要由单核细胞、树突状细胞及T细胞产生，可促进B细胞成熟和分化，在免疫应答中起重要作用，并与自身免疫密切相关。膜型BAFF主要表达于抗原提呈细胞，蛋白酶可使之水解而转变为可溶性BAFF。

通常检测BAFF的时候可以一起检测BCL-1，NF-KB等指标一起检测。

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

BAFF Western blot实验检测

与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

注意事项：

1.  一抗、二抗的稀释度、作用时间和温度对不同的蛋白要经过预实验确定*条件。
 

2.  显色液必须新鲜配置使用，zui后加入H₂O₂。
 

3.  DAB有致癌的潜在可能，操作时要小心仔细。