促黄体生成激素放免试剂盒怎么操作

促黄体生成激素放免试剂盒基本信息简介

中文名 促黄体生成激素；外文名  luteinizing hormone；属于促性腺激素的一种 简    称 LH 亦称促间质细胞激素。促黄体生成激素是由脑垂体前叶嗜碱性细胞分泌的，它作用于成熟的卵胞，能引起排卵并生成黄体。还可促进黄体、内荚膜和间质细胞分泌动情素。在雄性动物，它作用于睾丸的间质细胞促进其分泌雄性激素。由于雄性激素的作用，在第二性征发育过程中，精子完成发育。LH促进类固醇激素合成作用，据认为是以生成作为第二信息的cAMP为媒介的。LH为糖蛋白，分子量约3万。在酸性溶液中，可解离成分子量约为15000的互不相同的两个单基物（亚单位）。

羊的LH的两条多肽链（单基物）的氨基酸排列已经确定。其单基物之一与促卵泡激素（FSH）和促甲状腺激素（TSH）的单基物之一方有着共同或相似的结构。脑垂体分泌的LH，是受丘脑下部生成的黄体生成素释放因子所促进的。

促黄体生成激素放免试剂盒操作方法简介

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

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