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做Western实验时,各种裂解液怎么选择

更新时间:2017-02-28      浏览次数:3644

Western 及 IP细胞裂解液、RIPA裂解液、NP-40裂解液、SDS裂解液的用途?
 
用于普通的Western 、IP或co-IP,我们推荐使用Western及IP细胞裂解液,该裂解液已被国内各大研究机构广泛使用,用户普遍反映很好。裂解细胞或组织后,没有非常粘滞的透明状DNA团块形成,不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。

另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化,蛋白的Western 检测。对于某些特殊蛋白的IP,如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。如果发现IP的时候背景很高,即非特异的蛋白也被IP下来,则需要选用裂解强度较高的裂解液,例如RIPA裂解液(强或中)。

如果发现目的蛋白无法被IP下来,则说明裂解液的强度过强,可以使用较为温和的裂解液如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。对于某些难溶解蛋白的Western,如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的裂解液,例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。

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